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  Q1: Immunochemistry kit常見問題集~
     
  Q2: Mirus labeling kit常見問題集~
     
  Q3: 該如何選擇好的transfection reagent呢?
     
  Q4: 我去年有買好幾組jetPEI,現在jetPEI出新的protocol了,請問我之前買的 jetPEI 可以用新的protocol嗎?
     
  Q5: 我想送siRNA進Cortical neuron, 該用哪個試劑呢?有相關使用方法嗎?
     
     

  A1:   Immunochemistry kit常見問題,請參閱
       
  A2:   Mirus labeling kit常見問題,請參閱
       
  A3: 1. 不具侵略性: 一般reagent以liposome為媒介方式,,但liposome在與bi-layer membrane 融合時,較易將包外有毒物質一併帶入.對細胞造成傷害
    2. 低毒性:reagent 本身對細胞的傷害
    3. Off-target effects:越多的siRNA conc.越有機會造成non-specific effect!
    4. Antibiotic and serum compatible: medium 內含有antibiotic 可避免transfection 過程中汙染的機會; medium 內含有serium, 不會中止細胞在transfect 期間的生長.
    5. 低cell confluence: 低的細胞量,其transfect效率越高,並且,當基因incubate 越久才會表現時,越需更少量的細胞量,才不會在48,72hr時cell 過量,造成細胞狀況不好
    6. 高的擴散率: siRNA + reagent complex 進入cell後,越早均勻擴散.實驗成功機會越高
       
  A4:   可以, Polyplus於2008年8月推出jetPEI新的protocol,讓您操作上更方便
簡單,所以新的protocol是可以試用在之前賣出和現在的jetPEI,新的protocol
請見附件!
       
  A5:   您好,建議使用INTERFERin來送siRNA進入Cortical neuron
以下是原廠測試的操作方法:
      - Seed 50 000 cells per well in precoated plates (polylysine)
      - Transfect the cells 4 days after seeding them
      - Test 20 and 50 nM siRNA
      - Use 2 µl of INTERFERin per well
      - Before transfection, remove cell culture medium and store the medium at
37°C.
      - During transfection, maintain the cells in 1 ml of neurobasal medium for 4
hours
      - 4 hours after transfection, replace transfection medium by 50% old medium
50% fresh complete medium